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更新(月/日/年):2025 年 5 月 22 日

通过颜色确定抗体变性程度

―根据 IgG 构象改变发光颜色的荧光素―

 
研究人员) NISHIHARA Ryo,高级研究员,KIHARA Yoshiki,技术人员(研究时),KURITA Ryoji,附属于健康医疗研究所

积分

  • 开发了一种天然荧光素类似物,使用免疫球蛋白 G (IgG) 作为发光反应的催化剂
  • 成功根据IgG的构象改变发光颜色
  • 在抗体质量评估方面的潜在应用,因为可以快速、轻松地确定变性程度。

新研究成果图

天然荧光素类似物改变其发射颜色以反映抗体的构象状态


背景

免疫球蛋白 G (IgG) 等抗体在识别和消除体内病毒和细菌方面发挥着重要作用,广泛用作诊断和治疗剂。然而,抗体的结构很容易受到储存条件和环境的影响,逐渐变性损害其原有的功能。由于抗体变性影响产品的安全性和功效,因此必须监测变性的进展。目前,尺寸排阻色谱(SEC)和动态光散射(DLS)等分析方法用于评估抗体变性。然而,这些分析方法需要专门的知识和技能。因此,需要开发一种能够更简单、更快速地评估抗体变性程度的方法。

 

摘要

AIST 和庆应义塾大学的研究人员开发了一种发光底物(荧光素),可与 IgG(一种广泛用于治疗和诊断目的的抗体)发生反应,并根据 IgG 的结构改变其发射颜色。

抗体在体内发挥识别和消除病毒和细菌的作用,广泛用作诊断和治疗剂。但抗体在制造、储存和使用过程中很容易受到环境的影响,变性后就失去了原有的功能。

在这项研究中,我们首次发现IgG这种抗体具有催化荧光素发光反应的“伪荧光素酶活性”。我们还开发了一种利用这种活性的 IgG 变性检测技术。由于这种新设计和合成的荧光素的发射波长根据 IgG 的结构而变化,因此通过测量可以轻松定量地评估 IgG 变性的程度。该方法比传统的抗体荧光分析方法具有更高的灵敏度,并且由于只需混合新开发的荧光素即可在3分钟内完成测量,因此有望为IgG相关药物的质量控制和诊断剂的开发做出贡献。

 

文章信息

期刊:分析化学
论文标题:免疫球蛋白 G (IgG) 中伪荧光素酶活性的发现及其在 IgG 变性检测中的应用
作者:Ryo NISHIHARA、Yoshiki KIHARA、Eiji YAMAMOTO、Hidenori HIRANO、Ryoji KURITA
DOI:101021/acsanalchem5c00646

 



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