公告/发布日期:2017/02/23

米乐m6官方网站 新方法分析活性污泥引起的水处理膜堵塞

-共焦反射显微镜与新一代测序仪的分析相结合-

积分

  • 利用共焦反射显微镜无损观察水处理膜堵塞过程
  • 使用下一代测序仪分析大规模鉴定生物膜中的微生物
  • 发现生物膜中的脂质导致水处理膜堵塞的现象


摘要

米乐m6官方网站【会长中钵良二】(以下简称“AIST”)环境管理研究部【研究主任田中干也】环境微生物研究组研究员稻叶智博、首席研究员堀智之等共焦反射显微镜生物膜的无损观测技术和下一代测序仪水处理膜堵塞的原因。

 尽管已经提出了关于生物膜堵塞水处理膜的原因和机制的模型,但由于分析真实环境中水处理膜的状态在技术上很困难,许多问题仍不清楚。这次,荧光探针细胞衍生的聚合物此外,他们使用下一代测序仪一次性识别出了生物膜中的数十万种微生物。在此基础上,我们分析了导致膜堵塞的病原体和微生物。

8900_8987猎物与猎物的关系死细胞膜脂质积聚在水处理膜上,这是与传统模型不同的膜堵塞机制。

 该成果详情于2017年2月23日(英国时间)发表在国际学术期刊上npj 生物膜和微生物组

通过共焦反射显微镜观察膜封闭物质和微生物的图示
通过共焦反射显微镜观察膜封闭物质和微生物


发展的社会背景

 近年来,随着全球水资源短缺的加剧,社会对再生水的需求迅速增加。膜分离活性污泥法(MBR)(图1)是水处理和再生的核心技术,它使用膜将活性污泥(微生物的集合体)与处理后的水分离。标准活性污泥法与9946_9977|相比,它的优点是可以在更小的空间内提供更好的水质。

另一方面,最大的挑战是水处理膜堵塞的检测和控制,但其原因和机制的细节尚不清楚。因此,透过膜的水量和跨膜压差,即废水侧和处理水侧之间的压力差,被用作预测何时更换水处理膜的指标,并开发清洗膜的方法次氯酸

膜分离活性污泥法系统图
图1膜分离活性污泥法系统示意图

研究历史

 AIST的目标是开发水资源循环利用和安全保障技术。亚洲战略“水工程”中,我们明确了MBR处理性能与污泥微生物群落的关系,旨在建立基于微生物知识的MBR高活性维护管理技术。作为这项工作的一部分,我们一直在研究膜堵塞发生的机制,包括分析水处理膜上生物膜形成所涉及的微生物,目标是开发检测和控制水处理膜堵塞的技术。

研究内容

 采用两种不同有机物浓度的人工模拟模型废水(模型废水中有机物浓度:450 mg-货到付款/L 低负荷,900 mg-COD/L称为高负载)。为了研究这些模型废水引起的膜堵塞过程,我们使用共焦反射显微镜对水处理膜上的生物膜进行非破坏性可视化。跨膜压力是膜闭塞的指标,当在不同的跨膜压力下多次观察生物膜时,在高负载下观察到跨膜压力与生物膜厚度之间呈正相关(见图)。另一方面,在低负荷下没有观察到明显的相关性,这表明不同的有机物浓度通过不同的机制导致膜堵塞。此外,为了确定膜闭塞的原因,我们使用荧光探针对每种细胞来源的聚合物进行可视化,结果发现在低负载下检测到多糖为主要成分,而在高负载下检测到脂质为主要成分(图2)。

生物膜中细胞衍生的聚合物导致膜闭塞的图示
图 2 生物膜中细胞衍生的聚合物导致膜闭塞
在低负荷下,多糖的丰度大于脂质的丰度,而在高负荷下,脂质的丰度则明显更高。

 我们认为,生物膜厚度和组成成分的这些差异是由于形成生物膜的微生物类型不同所致,并且我们使用下一代测序仪大规模鉴定了生物膜中的微生物。结果发现,构成生物膜的主要微生物种类根据有机物浓度的不同而不同(图3)。

构成生物膜的微生物比例图
图3 组成生物膜的微生物百分比

 在低负荷和高负荷下,γ-变形菌纲微生物都会形成生物膜(图 3,蓝色)。然而,对γ-变形菌纲微生物物种的详细研究表明,在低负荷下,它们会在细胞外分泌多糖并形成生物膜。阿里什瓦内拉细菌属被发现是主要的微生物种类。这一结果与共聚焦显微镜观察到的多糖是低负荷下生物膜的主要成分的现象非常吻合(图2)。

另一方面,在高负荷下,γ-变形菌假单胞菌细菌是主要的微生物种类,如果跨膜压力过度增加,假单胞菌细菌属细胞质并留下细胞膜脂质蛭弧菌发现属于δ-变形菌属的细菌(图4,紫色)数量正在增加。这些结果强烈表明,通过共聚焦显微镜观察到,在高负荷下生物膜中积累的脂质来自于食菌细菌捕食的微生物的死细胞膜脂质。因此,我们提出了一种新模型,其中生物膜中不同类型细菌之间的捕食关系直接导致膜闭塞(图4)。基于该膜闭塞模型和目前的结果,人们认为可以通过使用例如在低负荷下有效去除多糖和微生物细胞的降解酶和次氯酸,以及在高负荷和高压差下有效去除脂质的碱性剂和表面活性剂来有效地清洁水处理膜。

本次提出的高负荷时膜闭塞过程模型图解
图4 本次提出的高负荷下膜闭塞过程模型

未来计划

 未来,我们将将此方法应用于不同有机物浓度和废水类型的单独MBR操作,以积累导致膜堵塞的成分和微生物的信息。利用这些知识,我们旨在提出适当的MBR运行和管理方法以及水处理膜维护和管理方法。



术语解释

◆共焦反射显微镜
一种使用共焦显微镜检测并可视化样品反射的照射光的反射光的观察方法。无需使用荧光染料或荧光蛋白,就可以非破坏性地可视化未处理的样品并观察其三维结构。[返回来源]
◆生物膜
由微生物群形成的结构的总称,例如浴室和下水道中的粘液以及牙菌斑。一般来说,处于生物膜状态的微生物对物理脱离和化学物质的抵抗力增强,水处理膜上生物膜的致密结构被认为会导致膜堵塞。[返回来源]
◆下一代测序仪
与传统方法相比,分析速度显着提高的 DNA 碱基测序装置。可同时并行鉴定多个样品中所含微生物的种类,每个样品可鉴定数万至数十万种,总计可鉴定数千万至数百万种。[返回来源]
◆水处理膜
具有微米至纳米尺寸的孔隙,用于去除废水中的颗粒、细菌、病毒等杂质的膜称为水处理膜。根据孔径的大小,可分为微滤膜、超滤膜、纳滤膜、反渗透膜等。[返回来源]
◆荧光探针
与特定物质结合时发出荧光的分子,或与特定物质结合并用荧光染料标记的分子的总称。这使得仅选择性地检测和可视化感兴趣的分子成为可能。[返回来源]
◆细胞衍生聚合物
生物膜内的微生物分泌到其自身细胞外的高分子化合物以及源自细胞本身的高分子化合物。它们包括多糖、蛋白质、核酸、脂质等,据说其存在是为了覆盖生物膜,增加其密度、强度和抗药性。这些聚合物化合物可以使用荧光探针单独检测和可视化。[返回来源]
◆捕食者与猎物的关系
也表达为吃与被吃之间的关系,这次指的是吃其他微生物的微生物种类与可吃的微生物种类之间的关系。这次,我们提出了一个模型,其中微生物之间的食物链导致膜堵塞。[返回来源]
◆死细胞膜脂质
源自死亡微生物细胞膜的脂质。在目前的研究成果中,它是指来源于被以微生物为食的微生物所捕食的猎物微生物的死亡细胞所产生的膜脂。[返回来源]
◆膜分离活性污泥法(MBR)
英文称为膜生物反应器,也缩写为MBR。这是一种将微生物处理和废水膜分离相结合的废水处理方法,作为产生清洁处理水的水处理和再生技术正在世界范围内推广。在膜分离活性污泥法中,主要采用微滤膜和超滤膜作为过滤膜。[返回来源]
◆标准活性污泥法
利用活性污泥(一种微生物复合体)去除废水中的有机物,然后使污泥沉降以获得处理水的净化方法通常称为标准活性污泥法。这是最常见、最广泛的废水处理方法。[返回来源]
◆次氯酸
俗称消毒剂、消毒剂的物质,也广泛用于清洗水处理膜,去除导致膜堵塞的生物膜。[返回来源]
◆亚洲战略“水工程”
 2012年在AIST启动的一个研究项目,旨在成为与确保水资源安全和有效利用相关的全球技术开发基地。目前,AIST内的七个研究单位正在共同努力推动这项活动。水利工程HP [返回来源]
◆货到付款
化学需氧量(COD)是表示水中存在的有机物被氧化剂分解时消耗的氧气量的值,是用作水质指标的值之一。货到付款具体是指以重铬酸钾为氧化剂得到的COD值,一般该值越高,水质越差。[返回来源]
◆细胞质
在微生物中结构简单的细菌中,被细胞膜包围的区域称为细胞质。细菌细胞质含有生长和增殖所需的DNA和蛋白质,一些食菌细菌通过捕食猎物细菌内部的细胞质来增殖。[返回来源]



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